T载体与目的片段大小一致时,怎么酶切回收啊

2022-09-11 05:48

1个回答

两条带都收了然后测序呗

相关问答

1个回答2022-08-02 15:43

酶发挥作用时，外部环境要有对应的温度，PH，如果外部环境不合适，酶也不能正常发挥作用。

4个回答2022-11-28 12:12

我们用天根公司的胶回收试剂盒，回收目的基因及载体双酶切后的产物用于连接，连接体系如下：一般载体1微升，目的基因8微升左右（没.测OD）,用T4DNA连接酶（购于TaKaRa公司）1微升，再加酶缓冲液（...

2个回答2022-09-20 16:33

将原题贴上，话说的不明不白,我有点无法理解。如果理论上：用用sacⅡ单酶后能出现你的目的条带，但实际上没有酶切出目的条带（t载体有），我认为原因是T载体自连，你的目的条带没有连上！建议重连，并用菌落P...

1个回答2023-04-27 07:35

应为PCR扩增出来的是混合物,酶切回收后才基本是纯的目的片段. 载体一般不用PCR扩增,一般是质粒来源,也需要用切口一致的酶消化回收. 之后连起来就好了

2个回答2022-08-12 12:17

用的是T-simple吗？如果不是simple载体，有可能切开的不是你引入的的没切位点，而是载体本身的

1个回答2024-02-29 05:16

接二连三一个接着一个，接连不断。 [拼音] jiē èr lián sān [出处] 清·曹雪芹《红楼梦》第九十九回：“贾母还要将李纨等挪过来；为着元妃薨后；家中事情接二连三；也无暇及此。” [例...

1个回答2022-12-27 09:23

2000bp的片段属于普通片段，常见载体都可以连接上，一般的普通T载体都可以使用。

2个回答2022-12-24 07:05

不可以，高保真酶产物一般都是平末端。纯化产物加taq酶，buffer和dNTP，72℃反应10~30分钟即可加尾，产物就可以直接与 T载体连接了。

1个回答2022-10-27 20:41

可能是质粒在转菌后部分碱基出现错配或者突变导致你酶切的位置发生变化.因为你pcr扩增只是你引物的位置只要不突变就可以正常扩增.建议你做个测序.

1个回答2024-02-29 06:33

一种限制性内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并能在特定的切点上切割DNA分子

热门问答

热门搜索更多