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你的目的基因两端加了酶切位点么？或者目的基因转录序列的外侧有没有酶切位点？有的话双酶切再连接。没有的话建议你设计带酶切位点的接头，然后再连到T载体上去。

这样。你先把含T载体的菌摇起来，提质粒，双酶切，割胶回收酶切片段（小的那一段，就是你要的基因）。2301载体你看看有没有那两个酶切位点，同尾酶也可以，双酶切，回收切开的载体。然后把载体和基因片段连接，转化感受态细菌，挑平板，就行了。不要用菌液，要用提出的质粒！酶切体系你购买酶的时候会告诉你的。

因为他讨厌若曦活得那么明媚，而他和他深爱的人都背负了些使命，所以他不开心，要为别人办事情，他看见活泼的若曦产生自卑的心理，所以她才讨厌若曦。

一，你MOD管理器不行，（游戏自带mod就没这事。
二。多MOD互相冲突。
三，需要代码、而你没有
四，MOD对应游戏版本不对。

陈翔演唱《如棋》

独化於陶钧之上，
步虚声里寄闲眠。
九州道袜败数路无豺虎，枯局
天近鳌头花簇仗。

独向青山更绝编，
步出都门雨告首后天。
九原何处不心伤，
天花下来惟有香。

都互相要理那个水滴水化其中的妹子是谁这个我们可以自己的查阅一下就可以得到答案的。

《独步天下》是由企鹅影视、悦凯影视、新丽传媒联合出品的古装爱情传奇剧，方芳、贾士凯任总制片人，邵警辉执导，白一骢任编审，林峰、唐艺昕领衔主演，张睿、屈楚萧、陈欣予、王凯熠、景岗山、黄德毅、晏紫东等联合主演 。
该剧改编自李歆的同名小说《独步天下》，主要讲述背负“可兴天下、可亡天下”预言的女真第一美女与清太宗皇太极之间的浪漫而坎坷的爱情故事 。
2016年11月15日，改编自作家李歆同名小说的IP大剧《独步天下》在横店举行了盛大的开机仪式。具体播出时间待定，预计将于2018年上映。

步入十九岁是说你从十八岁进到十九岁

因为叶宇身怀绝技，普通的雷击对他根本造不成一定的伤害，所以他也就不怕雷击。