如何根据一个单位点的突变体,研究一个基因的功能？

2023-02-05 16:10

已经得到了突变体，如何继续研究这个基因的功能

1个回答

2023-02-05 18:04

以下从植物领域来讲：
常规情况下，获得突变体后当定位克隆控制该性状的基因。找到突变位点后进行一些基本的分子实验和生信分析：
1）构建promoter+gDNA的互补载体，转化突变体，观察是否互补表型
2）构建Actin/Ubiquitin/35S+CDS+标签的载体，转化突变体，观察目的基因过表达的表型，同时标签蛋白可用于下游分子实验
3）构建CRISPR/Cas9敲除载体，观察在目的基因敲除下产生的表型
4）明确基因组织表达模式，亚细胞定位情况
5）paralog和ortholog是否有过研究，突变位点保守性如何
6）目的基因编码何种蛋白，有什么功能，突变位点位于哪个结构域，可能对蛋白功能造成哪些影响

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