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T载体连接问题
2022-09-17 04:22
2个回答
2022-09-17 06:03
可能目的片段两边没有加A,连不上T载体吧
2022-09-17 05:59
分析原因可能有:
1、T载体连接有问题,重新调整目的片段和T载体的比例,重新连接。
2、PCR某种试剂出问题了,以前有个师姐就是这样,怎么也扩不出来,让别人带样扩出来了,原来是Taq 酶出问题了,你也可以确定一下。
相关问答
连接T载和不连T载测序结果不一样怎么办
1个回答
2022-06-23 13:06
测序结果不一致,这个直接咨询给你测序的公司就行了。如果测序结果可信度高,这个相似性就太低了。 测序完成后是否有终止密码子就要看你测序的这一段是否包含了终止密码子了,这个需要你自己分析。
T载体连接问题
1个回答
2023-03-24 12:27
分析原因可能有: 1、T载体连接有问题,重新调整目的片段和T载体的比例,重新连接。 2、PCR某种试剂出问题了,以前有个师姐就是这样,怎么也扩不出来,让别人带样扩出来了,原来是Taq 酶出问题了,你也...
全文
成语典故连载 T
1个回答
2024-02-29 05:16
接二连三 一个接着一个,接连不断。 [拼音] jiē èr lián sān [出处] 清·曹雪芹《红楼梦》第九十九回:“贾母还要将李纨等挪过来;为着元妃薨后;家中事情接二连三;也无暇及此。” [例...
全文
为什么pcr产物可以直接连t载体
1个回答
2022-12-16 10:24
普通的taq聚合酶会在PCR反应过程中在3’末端加入一个碱基A,线性化平末端T载体的两端分别又人工加上一个额外的T碱基,从而可与PCR克隆产物的A末端互补配对,提高了PCR产物连接和克隆的效率。
T载体连接步骤是怎么样的?都要注意些什么呢?
1个回答
2022-06-20 15:34
PCR产物纯化后测定DNA的浓度,按照适当的比例与T-Vector在含有连接酶的buffer中4°过夜或37°3小时连接,然后连接产物涂筛选平板(ALB)筛选即可。 要确保产物末端有A尾,如果是高保真...
全文
什么是T载体?T载体分为哪几类?有什么区别?
1个回答
2022-10-05 06:45
T载体又称T-vector。聚合酶链反应产物的克隆运载体,线性化后两侧3′端各多出一个脱氧胸苷酸(T)。由于PCR产物两侧3′端通常含单个脱氧腺苷酸(A),与T载体之间的A-T互补性可提高PCR产物克...
全文
基因工程中常提到t载体,什么是t载体,t载体有什么作用
1个回答
2022-10-29 12:41
t载体就是T-DNA,是一类可以重组到受体生物染色体上的载体,通常被应用于植物的基因重组过程中。
t载体自连
1个回答
2022-12-18 21:16
1确认连接体系没有问题.2 确认设计引物的时候两边酶切位点的碱基和保护碱基没有问题.3 考虑PCR产物回收产物浓度提高一点.连T一般很容易的,我也做的单酶切连接,祝成功啦.
T载体是什么?
3个回答
2022-10-10 03:58
一段线性双链DNA载体,载体的两端3‘末端各有一个额外的T。因为大部分Taq聚合酶会在PCR产物3’末端添加一个额外的A,所以使用T载体可以比较方便且高效(相对于平末端)进行PCR产物的连接反应,以方...
全文
什么是t载体
2个回答
2022-09-12 00:08
应该是分子克隆用的载体,使用前是双链线性片段,上面有必要的测序或表达元件,两头是黏末端,各在3'有一个游离的t(故名t载体)。因为pcr实验中用的聚合酶大部分都是taq和taq的同类酶,会在pcr产物...
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